Merck默克C18色譜柱對司美格魯肽雜質的LC-MS快速分析
更新時間：2026-07-30 瀏覽次數：39
使用表面帶正電荷的PCS C18色譜柱對司美格魯肽雜質的LC-MS快速分析
GLP-1靶向治療藥物的市場需求快速增長，反向推動了藥品生產企業降低成本。此外，不當的處理和儲存也可能導致肽治療藥物中產生雜質。通過配制藥房分銷司美格魯肽等引起了人們的擔憂。這些治療藥物若未得到妥善處理，可能通過此途徑引入雜質，從而給患者帶來風險。此前已證實，在司美格魯肽配制過程中，可能存在因接觸微量甲醛而產生特定雜質的風險，這種接觸會導致N-末端組氨酸環化，使分子量發生12Da的改變。本應用展示了使用BIOshell™ A160 Peptide PCS-C18 15 cm x 2.1 mm, 2.7 µm（50659-U）色譜柱分離司美格魯肽及其N-末端修飾雜質。PCS C18表面帶有正電荷，能在LCMS的弱酸性條件下改善峰型。本方法能夠對復雜GLP-1樣品中潛在雜質進行高通量分析，從而評估患者風險。
色譜條件
色譜圖
圖1.100ng研究級司美格魯肽的色譜圖
在相同的分析條件下檢測了100ng配制型司美格魯肽樣品和100ng商品化司美格魯肽 (Ozempic®) 樣品。TIC圖分別顯示在圖2和圖3中，圖4展示了N端組氨酸修飾水平的放大比較。
圖2.100ng配制型司美格魯肽的TIC圖。
圖3.100ng商品化司美格魯肽 (Ozempic®) 的TIC圖。
圖4.配制型司美格魯肽 (A) 和商業樣品 (Ozempic®) (B) 的放大比較圖。配制型司美格魯肽樣品顯示N端組氨酸修飾（峰2）顯著增加。
如圖4所示，從配制樣品中可以觀察到大量的N端組氨酸修飾。而在藥用級 (Ozempic®) 樣品中觀察到的量要少得多。為了評估每種分析物的相對含量，采用了兩種不同的方法。第一種方法使用Freestyle軟件比較解卷積峰的豐度，計算每種物質的相對量，包括已鑒定的Na+和K+加合物。第二種方法涉及對TIC中的峰進行積分。
表3. 計算得出的修飾型 N 端組氨酸相對于FLP的相對量及其計算方法。
如表3所示，配制樣品中N端組氨酸修飾的水平比Ozempic®樣品高3-4倍。該濃度超過了FDA關于肽藥物中允許雜質水平的指南標準，并對患者構成風險。目前尚不確定是否已針對效價和免疫原性評估了該特定修飾。很明顯，任何含有該N端組氨酸的GLP-1激動劑，若制造或處理不當，都容易發生這種修飾。這種可能性包括利拉魯肽、司美格魯肽、度拉糖肽、艾塞那肽、利司那肽等。
BIOshell™ A160 Peptide PCS-C18在弱離子對條件下為堿性化合物保持了優異的峰形和分離度，使得在各種生物制藥制劑中能夠高效檢測雜質。利用BIOshell™ A160 Peptide PCS-C18色譜柱，能夠檢測到配制型司美格魯肽樣品中超過FDA指南標準的雜質，并且提出了一種方法學，該方法可用于篩選其他配制型司美格魯肽樣品的雜質相關風險。
BIOshell™ A160 Peptide PCS-C18
色譜柱特點：
使用低離子強度流動相條件，實現酸性、堿性和中性肽的高分離度
改善峰形，提高堿性化合物的載樣能力
能夠在SPP色譜柱上高流速使用，提高樣品通量
由于該色譜柱所需的流動相添加劑量較低，LC-MS靈敏度得到提高，可進行更準確的分析
訂購信息：
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